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PCR實(shí)驗(yàn)室的建立
為了對(duì)以個(gè)特定序列進(jìn)行PCR做重復(fù)檢測(cè),需要三個(gè)不同的區(qū)域,每一個(gè)區(qū)域的具體技術(shù)操作和試劑在下面詳細(xì)列出.1、樣品準(zhǔn)備區(qū)這個(gè)區(qū)域?qū)iT(mén)用作樣品的準(zhǔn)備,在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采取預(yù)防措施:1)PCR產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的DNA克隆不能在這個(gè)房間操作。2)組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理,以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。3)用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。4)DNA樣品應(yīng)該用有專(zhuān)門(mén)的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作...
6-4
2015
電泳時(shí)膠回收和凝膠成像的注意事項(xiàng)
電泳時(shí)膠回收切膠的注意事項(xiàng):1.電泳的buffer和gel都是新制的,切膠的臺(tái)子清理干凈,刀片洗凈滅菌,總之一句話就是保證切下的帶沒(méi)有外源dna污染。2.切膠是要把整個(gè)目的片斷所在位置的膠全部回收。為了減少膠的體積,可以用相對(duì)比較薄的膠來(lái)做,只要夠點(diǎn)樣即可,也可采用薄而寬的梳子來(lái)跑膠。3.關(guān)于防護(hù),在一般有機(jī)玻璃后就足夠了,戴上防護(hù)面具以保護(hù)眼睛,如果戴樹(shù)脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者對(duì)于膠有特殊要求,例如要求不含EB,可以采用點(diǎn)marker和帶刻度的尺子一起照相...
6-4
2015
酸度計(jì)(PH計(jì))的保養(yǎng)及注意事項(xiàng)
1)pH測(cè)試筆的保養(yǎng)及注意事項(xiàng):此測(cè)試筆出廠時(shí),已校準(zhǔn),可直接使用,下列情況須重新校準(zhǔn):校準(zhǔn)后已使用(或放置)很長(zhǎng)時(shí)間;電極使用特別頻繁;測(cè)量精度要求比較高;做校正時(shí),勿重復(fù)使用校正緩沖液;當(dāng)筆頭有白色結(jié)晶時(shí),此乃正?,F(xiàn)象請(qǐng)勿緊張,可用清水浸泡一段時(shí)間;滴幾滴保存液或校正緩沖液在筆套里面,請(qǐng)勿使用蒸餾水或純水來(lái)浸泡或保存測(cè)試筆;測(cè)試筆玻璃電極敏感球泡中可能有小氣泡,它將影響電極的正常測(cè)量,使用時(shí)應(yīng)搖動(dòng)電極,使氣泡跑出敏感球泡;玻璃電極易打破,使用時(shí)需小心;顯示值模糊或不顯示或...
6-3
2015
購(gòu)買(mǎi)低溫恒溫槽的注意事項(xiàng)
在實(shí)驗(yàn)室中我們經(jīng)常性的遇到要讓實(shí)驗(yàn)樣品處于一種特定的環(huán)境溫度下進(jìn)行實(shí)驗(yàn),低溫恒溫或高溫恒溫。在高溫恒溫中我們經(jīng)常用的高溫恒溫油槽,因?yàn)橛偷姆悬c(diǎn)很高,如果是水中則可以使用恒溫水浴箱、恒溫水浴鍋、低溫恒溫槽等儀器,這些儀器在水中的恒溫效果是很顯著的;如果需要低溫恒溫狀態(tài),一般都是采用低溫恒溫槽,不僅可以保持低溫,而且隨著技術(shù)的進(jìn)步,在恒溫狀態(tài)下的精度也在慢慢提高,珀西瓦爾低溫恒溫槽的精度已達(dá)到0.005。技術(shù)的進(jìn)步,科技的發(fā)展,這些低溫恒溫槽也在翻天覆地的變化著,精度更高、控溫更...
6-3
2015
電子天平的選擇、使用與維護(hù)保養(yǎng)
1要選擇合適的電子天平選擇電子天平,主要是考慮天平的稱(chēng)量和靈敏度應(yīng)滿足稱(chēng)量的要求,天平的結(jié)構(gòu)應(yīng)適應(yīng)工作的特點(diǎn)。選擇的原則是:既要保證天平不致超載而損壞,也要保證稱(chēng)量達(dá)到必要的相對(duì)準(zhǔn)確度,要防止用準(zhǔn)確度不夠的天平來(lái)稱(chēng)量,以免準(zhǔn)確度不符合要求;也要防止濫用高準(zhǔn)確度的天平而造成浪費(fèi)。2正確安裝首先,要選防塵、防震、防潮、防止溫度波動(dòng)的房間作為天平室,對(duì)準(zhǔn)確度較高的天平還應(yīng)在恒溫室中使用。其次,天平應(yīng)安放在牢固可靠的工作臺(tái)上,并選擇適當(dāng)?shù)奈恢冒卜?,以便于操作。天平安裝前,應(yīng)根據(jù)天...
6-3
2015
色譜柱填料的種類(lèi)及選擇
現(xiàn)代液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,首先必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。下面將對(duì)幾種常見(jiàn)的色譜填料極其各種的性能做各一個(gè)簡(jiǎn)要的介紹。(1)、硅膠填料硅膠填料主要應(yīng)用正相色譜及反相色譜柱中,正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性...
6-2
2015
基本型分配型流量型蠕動(dòng)泵有什么區(qū)別
蠕動(dòng)泵又叫恒流泵,也有叫軟管泵或者蠕動(dòng)軟管泵。國(guó)內(nèi)現(xiàn)在生產(chǎn)蠕動(dòng)泵的廠家眾多,但總結(jié)起來(lái)大于分類(lèi)有基本型蠕動(dòng)泵、流量型蠕動(dòng)泵、分配型蠕動(dòng)泵?;拘腿鋭?dòng)泵就是具備基本的流量輸送功能和相關(guān)的外部控制接口,通常這類(lèi)泵只顯示轉(zhuǎn)速,有一些基本的簡(jiǎn)單的間隙運(yùn)轉(zhuǎn)功能,這個(gè)功能的目的就是實(shí)現(xiàn)分配。但由于轉(zhuǎn)速與流量之間需要自己去計(jì)算,所以使用的時(shí)候不太直觀。流量型蠕動(dòng)泵是指泵可以有較大的液晶顯示屏,這個(gè)屏上可以顯示轉(zhuǎn)速和通過(guò)泵的單片機(jī)換算之后的流量顯示,同時(shí)這種泵也具備常用的外部控制接口和功能。...
6-2
2015
醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)原理帶電荷的蛋白質(zhì),在電場(chǎng)中向著與其所帶電荷電性相反的電極泳動(dòng)稱(chēng)為電泳。血清中各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同,但大都在pH7以下,若將血清置于pH8.6的緩沖液中,則這些蛋白質(zhì)均帶負(fù)電,在電場(chǎng)中都向陽(yáng)極移動(dòng)。由于各種蛋白質(zhì)在同一pH環(huán)境中所帶負(fù)電荷多少及分子大小不同,所以在電場(chǎng)中向陽(yáng)極泳動(dòng)速度也不同。蛋白質(zhì)分子小而帶電荷多者,泳動(dòng)速度快;反之,則泳動(dòng)速度慢。因此可將血清蛋白質(zhì)依次分為清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五條區(qū)帶,經(jīng)染色可計(jì)算出各血清蛋白質(zhì)含量的...
6-2
2015
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